DCAF12

更新于：2025-05-07

基本信息

别名

Centrosome-related protein TCC52、CT102、DCAF12

+ [9]

简介

Substrate-recognition component of a DCX (DDB1-CUL4-X-box) E3 ubiquitin-protein ligase complex of the DesCEND (destruction via C-end degrons) pathway, which recognizes a C-degron located at the extreme C terminus of target proteins, leading to their ubiquitination and degradation (PubMed:16949367, PubMed:16964240, PubMed:29779948). The C-degron recognized by the DesCEND pathway is usually a motif of less than ten residues and can be present in full-length proteins, truncated proteins or proteolytically cleaved forms (PubMed:29779948). The DCX(DCAF12) complex specifically recognizes proteins with a diglutamate (Glu-Glu) at the C-terminus, such as MAGEA3, MAGEA6 and CCT5, leading to their ubiquitination and degradation (PubMed:29779948, PubMed:31267705). Ubiquitination of MAGEA3, MAGEA6 by DCX(DCAF12) complex is required for starvation-induced autophagy (PubMed:31267705). Also directly recognizes the C-terminal glutamate-leucine (Glu-Leu) degron as an alternative degron in proteins such as MOV10, leading to their ubiquitination and degradation. Controls the protein level of MOV10 during spermatogenesis and in T cells, especially after their activation (PubMed:34065512).

关联

项与 DCAF12 相关的药物

CN115487308

专利挖掘

靶点

DCAF12

作用机制-

在研机构

哈药（北京）生物科技有限公司 [+1]

原研机构

北京大学 [+1]

在研适应症

肝病 [+1]

非在研适应症-

最高研发阶段药物发现

首次获批国家/地区-

首次获批日期1800-01-20

100 项与 DCAF12 相关的临床结果

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100 项与 DCAF12 相关的转化医学

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项与 DCAF12 相关的文献（医药）

2024-03-28·PNAS Nexus

Probing the CRL4DCAF12 interactions with MAGEA3 and CCT5 di-Glu C-terminal degrons

Article

作者: Righetto, Germanna Lima ; Loppnau, Peter ; Szewczyk, Magdalena M ; Duda, David M ; Barsyte-Lovejoy, Dalia ; Mei, Tony ; Patrick, Aaron N ; Chaudhry, Charu ; Li, Yanjun ; Santhakumar, Vijayaratnam ; Vu, Victoria ; Zeng, Hong ; Yin, Yanting ; Li, Yen-Yen ; Halabelian, Levon ; Brazeau, Jean-Francois ; Seitova, Alma

AbstractDamaged DNA-binding protein-1 (DDB1)- and CUL4-associated factor 12 (DCAF12) serves as the substrate recognition component within the Cullin4–RING E3 ligase (CRL4) complex, capable of identifying C-terminal double-glutamic acid degrons to promote the degradation of specific substrates through the ubiquitin proteasome system. Melanoma-associated antigen 3 (MAGEA3) and T-complex protein 1 subunit epsilon (CCT5) proteins have been identified as cellular targets of DCAF12. To further characterize the interactions between DCAF12 and both MAGEA3 and CCT5, we developed a suite of biophysical and proximity-based cellular NanoBRET assays showing that the C-terminal degron peptides of both MAGEA3 and CCT5 form nanomolar affinity interactions with DCAF12 in vitro and in cells. Furthermore, we report here the 3.17 Å cryo-EM structure of DDB1–DCAF12–MAGEA3 complex revealing the key DCAF12 residues responsible for C-terminal degron recognition and binding. Our study provides new insights and tools to enable the discovery of small molecule handles targeting the WD40-repeat domain of DCAF12 for future proteolysis targeting chimera design and development.

2023-02-15·The EMBO Journal

Recognition of the CCT5 di‐Glu degron by CRL4^DCAF12 is dependent on TRiC assembly

Article

作者: Kempf, Georg ; Pla‐Prats, Carlos ; Thomä, Nicolas H ; Cavadini, Simone

AbstractAssembly Quality Control (AQC) E3 ubiquitin ligases target incomplete or incorrectly assembled protein complexes for degradation. The CUL4‐RBX1‐DDB1‐DCAF12 (CRL4DCAF12) E3 ligase preferentially ubiquitinates proteins that carry a C‐terminal double glutamate (di‐Glu) motif. Reported CRL4DCAF12 di‐Glu‐containing substrates include CCT5, a subunit of the TRiC chaperonin. How DCAF12 engages its substrates and the functional relationship between CRL4DCAF12 and CCT5/TRiC is currently unknown. Here, we present the cryo‐EM structure of the DDB1‐DCAF12‐CCT5 complex at 2.8 Å resolution. DCAF12 serves as a canonical WD40 DCAF substrate receptor and uses a positively charged pocket at the center of the β‐propeller to bind the C‐terminus of CCT5. DCAF12 specifically reads out the CCT5 di‐Glu side chains, and contacts other visible degron amino acids through Van der Waals interactions. The CCT5 C‐terminus is inaccessible in an assembled TRiC complex, and functional assays demonstrate that DCAF12 binds and ubiquitinates monomeric CCT5, but not CCT5 assembled into TRiC. Our biochemical and structural results suggest a previously unknown role for the CRL4DCAF12 E3 ligase in overseeing the assembly of a key cellular complex.

2022-10-01·Developmental Biology

DDB1- and CUL4-associated factor 12-like protein 1 (Dcaf12l1) is not essential for male fertility in mice

Article

作者: Punab, Margus ; Laan, Maris ; O'Bryan, Moira K ; Lopes, Alexandra M ; Krausz, Csilla ; Nguyen, Joseph ; Aston, Kenneth Ivan ; Merriner, D Jo ; Riera-Escamilla, Antoni ; Nagirnaja, Liina ; Houston, Brendan J ; O'Connor, Anne E ; Conrad, Donald F

Male infertility is a common condition affecting at least 7% of men worldwide and is often genetic in origin. Using whole exome sequencing, we recently discovered three hemizygous, likely damaging variants in DDB1- and CUL4-associated factor 12-like protein 1 (DCAF12L1) in men with azoospermia. DCAF12L1 is located on the X-chromosome and as identified by single cell sequencing studies, its expression is enriched in human testes and specifically in Sertoli cells and spermatogonia. However, very little is known about the role of DCAF12L1 in spermatogenesis, thus we generated a knockout mouse model to further explore the role of DCAF12L1 in male fertility. Knockout mice were generated using CRISPR/Cas9 technology to remove the entire coding region of Dcaf12l1 and were assessed for fertility over a broad range of ages (2-8 months of age). Despite outstanding genetic evidence in men, loss of DCAF12L1 had no discernible impact on male fertility in mice, as highlighted by breeding trials, histological assessment of the testis and epididymis, daily sperm production and evaluation of sperm motility using computer assisted methods. This disparity is likely due to the parallel evolution, and subsequent divergence, of DCAF12 family members in mice and men or the presence of compounding environmental factors in men.

项与 DCAF12 相关的新闻（医药）

2024-08-28

·生物制药小编

活体成像细胞模型的选择

动物模型实验是药物研发和生物医学研究不可或缺的手段，在新药试验、疾病诊断、药物与医疗器械安全性研究等领域被广泛使用，通过动物实验，可取得真实可靠的研究数据。传统的动物模型实验方法存在一定局限性和不足，特别是需要大量的动物分组和在不同时间点解剖获取数据, 得到多个时间点的实验结果，存在工作量大和组间差异问题。相比之下，活体成像技术通过对同一组实验对象在不同时间点进行成像，跟踪同一观察目标（标记细胞和标记分子）的移动及变化，不存在常见的组间差异，工作量和实验动物消耗可大为减少，所得的数据也更加真实可信。此外, 活体成像技术不涉及放射性物质，具有操作简单，所得结果直观，灵敏度高等特点，可用于追踪靶细胞数量，体积变化和体内分布，从分子和细胞水平对药物疗效进行评估。下单好礼活动时间：24年8.28-9.30 1.活动期间购买示踪细胞，可享8折优惠！ 2.下单时备注“示踪有礼”，即可获赠科佰生物送出的惊喜好礼！示踪细胞的构建与使用在活体成像技术的应用过程中，示踪细胞选择和标记非常关键，对于示踪细胞构建过程主要为以下几个步骤： 1. 选择符合实验需求和成瘤性指标的母细胞，需要采用来源正确，成瘤性良好，传代次数较低，状态保持良好的细胞株作为母细胞； 2. 选择适合的标记蛋白，常用的标记蛋白有Firefly Luciferase，GFP，EGFP, RFP, YFP等； 3. 选择标记蛋白表达载体和基因导入方式（常用慢病毒方式），筛选稳定细胞株； 4. 示踪细胞体外发光测试，测定发光信号强度和细胞传代信号稳定性，确保示踪细胞在体外和体内都能稳定高水平表达标记蛋白，以科佰生物A549-Luc细胞为例： Figure 2. Detect Luciferase assay by Promega Bright-Glo Luciferase Assay System.The number of Luminescence signal is 524±9(Mean±SD) on A549 cells while 898951±21097(Mean±SD) on A549-Luc cells. Figure 3. Stablity test results. A549-Luc cells showed at least 32 passage stability with similar luminescence unit. 5. 根据实验需要通过尾静脉注射、皮下移植、原位移植等方法在动物体内接种已标记的示踪细胞。 6. 活体成像：动物经麻醉（气麻/针麻）后放入成像暗箱平台，开启照明灯（明场）拍摄背景图。关闭照明灯，在没有外界光源的条件下（暗场）拍摄由小鼠体内发出的特异性光子。明场与暗场的背景图叠加后可以直观的显示动物体内特异光子的部位和强度，完成成像操作。值得注意的是荧光成像需要选择合适的激发光和发射光滤光片，生物发光则需要成像前注射luciferase底物。 7. 数据处理：动物活体成像图像处理软件除了提供含有光子强度标尺的成像图片外，还能计算分析发光面积、总光子数、光子强度的相关参数供实验者参考。科佰助力文献发表在示踪细胞的构建方面，科佰生物有着多年丰富经验以及多株示踪细胞现货，进一步助力客户发表高分文献。以下是7篇高分文章精选，总计IF:71.6，其中最高 IF为15.1。 01 | Glioma261-Luc 文献标题：Reversing T Cell Dysfunction to Boost Glioblastoma Immunotherapy by Paroxetine-Mediated GRK2 Inhibition and Blockade of Multiple Checkpoints through Biomimetic Nanoparticles 第一作者：Tingting Wang 单位：苏州大学放射医学与辐射防护国家重点实验室发表期刊: Advanced Science 影响因子: 15.1 发表日期: 2023-01-25 DOI: 10.1002/advs.202204961 文章主题：T细胞功能障碍诱导的肿瘤免疫逃逸在胶质母细胞瘤（GBM）中尤为严重，并显著影响免疫治疗的疗效。创新性地逆转T细胞功能障碍对改善GBM免疫治疗至关重要。在此，通过重新利用美国食品和药物管理局批准的抗抑郁药物帕罗西汀（PX）与仿生纳米颗粒（CS-J@CM/6 NPs），T细胞功能障碍被显著逆转，并促进了GBM的免疫治疗。PX成功应用于消除GBM小鼠骨髓中的T细胞隔离，并增加它们在肿瘤中的浸润。仿生NPs由超小的Cu2−xSeNPs、JQ1和CD6修饰的肿瘤细胞膜组成，通过CD6与活化的白细胞粘附分子的特异性相互作用有效地进入肿瘤。它们通过负载JQ1的双重作用改善T细胞功能障碍，同时降低T细胞和T细胞上PD-1的表达和PD-L1的表达。NP还能诱导肿瘤细胞的免疫原性细胞死亡，从而激活免疫反应。PX和仿生CS-J@CM/6 NPs的协同作用显著提高了GBM携带小鼠的存活率。这项工作通过重新利用晚期NPs的“旧药物”，为肿瘤免疫治疗提供了新的见解。 Cobioer合作产品: Glioma261-Luc 货号：CBP30157L 02 | NCI-N87-Luc 文献标题：Engineering Bifunctional Calcium Alendronate Gene-Delivery Nanoneedle for Synergistic Chemo/Immuno-Therapy Against HER2 Positive Ovarian Cancer. 第一作者：Guochuang Chen 单位：深圳新诺微环生物科技有限公司和广东中山大学附属第七医院精准医学研究中心发表期刊:Advanced science 影响因子: 15.1 发表日期: 2023-03-18 DOI: 10.1002/advs.202204654 文章主题：卵巢癌是最致命的妇科恶性肿瘤。大多数患者在晚期被诊断出，伴有广泛的腹膜扩散和腹水。双特异性T细胞衔接器（BiTEs）在血液恶性肿瘤中表现出了令人印象深刻的抗肿瘤疗效，但在实体肿瘤中的临床疗效受到限制，原因包括半衰期短、需要持续静脉输注以及相关治疗水平下的严重毒性。为了解决这些问题，本研究报道了一种基于阿仑膦酸钙（CaALN）的基因传递系统设计，用于表达治疗水平的BiTE（HER2×CD3），以实现高效的卵巢癌免疫治疗。通过简单的绿色配位反应实现了CaALN纳米球和纳米针的可控构建，具有高长宽比的纳米针状阿仑膦酸（CaALN-N）在体内无系统毒性的情况下实现了高效的基因传递至腹膜。特别是，CaALN-N通过下调HER2信号通路诱导SKOV3-luc细胞凋亡，并与HER2×CD3协同作用产生高抗肿瘤反应。在体内给药CaALN-N/minicircle DNA编码HER2×CD3（MC-HER2×CD3）可产生持续的治疗水平的BiTE，并抑制人类卵巢癌异种移植模型中的肿瘤生长。总的来说，工程阿仑膦酸钠钙纳米针是一种高效和协同治疗卵巢癌的双功能基因传递平台。 Cobioer合作产品: NCI-N87-Luc 货号：CBP30122L 03 | 4T1-Luc 文献标题：Reducing PD-L1 expression with a self-assembled nanodrug: an alternative to PD-L1 antibody for enhanced chemo-immunotherapy 第一作者：Shuxian Cai 单位：福州大学食品安全与生物分析教育部重点实验室发表期刊:Theranostics 影响因子: 12.4 发表日期:2021-01-01 DOI:10.7150/thno.45777 文章主题：免疫检查点、程序性细胞死亡配体 1（PD-L1）和程序性细胞死亡1（PD-1）之间的结合会损害 T 细胞介导的免疫监视。使用免疫检查点抑制剂（ICI）阻断癌细胞膜上的PD-L1或活化T细胞膜上的PD-1的免疫检查点治疗可以恢复T细胞的抗肿瘤功能。然而，PD-L1 的细胞内表达及其在癌细胞膜上的活性再分布可能会损害 ICI 的治疗益处。为了解决这个问题，我们开发了一种能够降低PD-L1表达和增强抗肿瘤作用的纳米药物（MS NPs）。该纳米药物由免疫佐剂二甲双胍（Met，一种老药）和抗癌剂7-乙基-10-羟基喜树碱（SN38）通过氢键和静电相互作用自组装而成。开展了一系列实验，包括MS NPs的表征、MS NPs介导的PD-L1表达下调和治疗效果的验证、MS NPs介导的化学免疫治疗和肿瘤转移抑制。与构象阻断癌细胞膜PD-L1的ICIs不同，MS NPs通过二甲双胍直接降低PD-L1水平，实现免疫治疗。因此，MS NPs显示出比同类产品更强的化学免疫治疗效果。MS NPs还通过重塑细胞外基质和恢复免疫监视来有效抑制肿瘤转移。此外，MS NPs治疗小鼠的主要器官未观察到明显毒性，MS NPs治疗后小鼠存活率高。我们通过免疫佐剂Met和抗癌剂SN38的自组装设计了纳米药物MS NPs，用于免疫治疗和化疗的联合治疗。MS NPs可能会打破免疫治疗中基于抗体的ICIs的僵局，而重新利用旧药可能为新型ICI的开发提供新的视角。 Cobioer合作产品: 4T1-Luc 货号：CBP30102L 04 | HepG2-Luc 文献标题：Modified ASO conjugates encapsulated with cytidinyl/cationic lipids exhibit more potent and longer-lasting anti-HCC effects 第一作者：Yufei Pan 单位：北京大学天然药物及仿生药物国家重点实验室发表期刊: Molecular Therapy-Nucleic Acids 影响因子: 8.8 发表日期 :2023-05-04 DOI:10.1016/j.omtn.2023.04.028 文章主题：反义寡核苷酸（ASOs）是一类以mrna或基因为靶点的治疗方法。然而，在体内靶组织的有效传递和最佳积累仍然是一个具有挑战性的问题。CT102是一种靶向IGF1R mRNA并诱导细胞凋亡的ASO。本文对脂质体传递的ASOs的组织分布进行了详细的探索。基于DCP（胞苷基/阳离子脂质DNCA/CLD和DSPE-PEG）和寡核苷酸之间的多种分子间相互作用，包括氢键、p-p堆积和静电相互作用，确定了一种导致肝脏积累增加的配方。结构优化的ct102为肝癌的治疗提供了一种新的策略。gapmer CT102MOE5和偶联物Glu-CT102MOE5在体外100 nM时表现出良好的抗增殖和IGF1R mRNA抑制作用，在体内较低的剂量和给药频率下具有更高的疗效。结合转录组和蛋白质组分析显示，在ASO治疗中可能同时存在额外的相关靶点和功能调控。这些结果表明，脂质包封和结构优化结合在寡核苷酸药物的传递中具有良好的临床应用前景。 Cobioer合作产品: HepG2-Luc 货号：CBP30043L 05 | A549-Luc 文献标题：Okicamelliaside targets the N-terminal chaperone pocket of HSP90 disrupts the chaperone protein interaction of HSP90-CDC37 and exerts antitumor activity 第一作者：Chuan-jing Cheng 单位：南开大学药物化学生物学全国重点实验室和天津市分子药物研究重点实验室发表期刊: Acta Pharmacologica Sinica 影响因子: 8.2 发表日期: 2021-07-29 DOl: 10.1038/s41401-021-00737-x 文章主题：热休克蛋白90（HSP90）已被公认为癌细胞的关键靶标。然而，靶向 HSP90 的 ATP 结合位点的各种毒性反应可能不是 HSP90 抑制剂的最佳选择。在本文中，发现了一种具有抗肿瘤作用的鞣花酸衍生物，即okicamelliside（OCS）。为了确定潜在的抗癌机制，将OCS光敏探针应用于靶点钓鱼和追踪。化学蛋白质组学和蛋白-药物相互作用实验表明，HSP90是OCS的关键靶点，具有很强的结合亲和力（K = 6.45 μM）。靶蛋白突变分析和分子动力学模拟表明，OCS可以竞争性作用于HSP47 N端伴侣口袋的关键Glu-90位点，其中共伴侣CDC37与HSP90结合，影响其稳定性并降低HSP90-CDC37的∆G。结果表明，OCS破坏了HSP90-CDC37的蛋白质-蛋白质相互作用;选择性影响 HSP90 下游激酶客户端蛋白，包括 CDK4、P-AKT 和 P-ERK1/2;并对A549细胞发挥抗肿瘤作用。此外，肿瘤异种移植实验以同样的方式证明了OCS的高抗肿瘤活性和低毒性。我们的研究结果发现了一种新型的 HSP90 N 末端伴侣口袋天然抑制剂，即OCS，它选择性地抑制 HSP90-CDC37 蛋白复合物的形成，并为 HSP90 抑制剂用于抗癌候选药物提供了进一步的见解。 Cobioer合作产品: A549-Luc 货号：CBP30021L 06 | U87/DK_Luc 文献标题：Blockade of the forward Na+ /Ca2+ exchanger suppresses the growth of glioblastoma cells through Ca2+‐mediated cell death 第一作者：Hui-Jie Hu 单位：上海交通大学医学院基础医学院药理学与化学生物学系发表期刊:British Journal of Pharmacology 影响因子: 7.3 发表日期: 2019-06-17 DOI : 10.1111/bph.14692 文章主题：Na+/Ca2+交换器（NCX）以正向或反向模式工作，参与维持细胞内Ca2+（[Ca2+]i）稳态，这对决定细胞命运至关重要。此前，许多针对反向或正向NCX的阻滞剂已经被开发和研究在缺血组织损伤中，但很少在胶质母细胞瘤中被检测到，用于抗肿瘤治疗。我们评估了NCX阻滞剂对胶质母细胞瘤生长的影响，以及NCX是否可以成为治疗的靶点。 NCX的低表达使胶质母细胞瘤细胞对[Ca2+]i的干扰敏感。旨在阻断正向NCX的干预措施可导致ca2+介导的胶质母细胞瘤损伤，从而具有治疗潜力。贝普利地尔可能是开发新的抗肿瘤药物的先导化合物。 Cobioer合作产品: U87/DK-Luc 货号：CBP30189L 07 | 4T1-Luc 文献标题：Saikosaponin A Inhibits Triple-Negative Breast Cancer Growth and Metastasis Through Downregulation of CXCR4 第一作者：Ying Wang 单位：上海中医药大学药学院发表期刊:Frontiers in oncology 影响因子: 4.7 发表日期:2020-01-28 DOI:10.3389/fonc.2019.01487 文章主题：由于缺乏公认的治疗分子靶点，与其他乳腺癌亚型不同，三阴性乳腺癌（TNBC）患者通常没有从靶向药物的进展中受益。CXCR4/SDF-1轴参与TNBC的肿瘤生长和转移。因此，下调癌细胞中CXCR4的表达是抑制原发肿瘤生长和TNBC转移的潜在治疗策略。为了鉴定中药中抑制CXCR4表达的生物活性化合物，我们研究了柴胡皂苷A（SSA）对TNBC细胞中CXCR4表达和功能的影响能力。对细胞生长、迁移、侵袭和蛋白表达进行分析。还使用了小干扰RNA（siRNA）和非侵入性生物发光的敲低。SSA 减少了 SUM149 和 MDA-MB-231 细胞的增殖和集落形成。SSA抑制TNBC细胞的迁移和侵袭。对于小鼠，SSA抑制原发肿瘤生长并减少高度转移性三阴性4T1-luc细胞的肺转移。SSA 抑制CXCR4 表达，但不调控 CXCR7 表达，并且 .CXCR4表达下调逆转了对TNBC细胞迁移和侵袭的抑制作用。此外，SSA使Akt/mTOR信号通路失活，抑制MMP-9和MMP-2表达。结果表明，SSA通过抑制CXCR4表达发挥抗TNBC作用，因此有可能成为TNBC患者的候选治疗剂。 Cobioer合作产品: 4T1-Luc 货号：CBP30102L 科佰生物科佰生物示踪细胞具备优良的信号和严格QC，是活体成像实验的好帮手。 1. 优质母细胞，具备STR验证数据 2. 高信噪比 Figure 13. Detect Luciferase assay by Promega Bright-Glo Luciferase Assay System..The number of Luminescence signal is 552±24(Mean±SD) on KLN 205 cells while 636872±35212(Mean±SD) on KLN 205-Luc cells. 3.体外高稳定性 Figure 14. Stablity test results. KLN 205-Luc cells showed at least 32 passage stability with similar luminescence unit. 下单好礼活动时间：24年8.28-9.30 1.活动期间购买示踪细胞，可享8折优惠！ 2.下单时备注“示踪有礼”，即可获赠科佰生物送出的惊喜好礼！药物靶点模型科佰生物公司十分重视研发创新，凭借细胞功能改造技术、高精度和灵活的基因编辑工具平台，提供包括激酶，GPCR，示踪，免疫治疗，耐药等多类疾病靶点的药物检测细胞模型。目前已覆盖四百多株现货细胞模型，同时提供高质量的Cell-base生物测活服务。关注科佰生物了解更多资讯电话：4008-750-250 全国销售经理：18066071954华东销售经理：18240630236 邮箱：sales@cobioer.com 网站：www.cobioer.com

放射疗法